河北省唐山一中高二下学期期末考试——生物

33．（10分）阅读材料，回答下列问题：

花粉粒通道法是指：将毒素蛋白基因，利用植物受精后花粉萌发形成的花粉管通道进入胚囊，导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞，借 助天然的种胚系统，形成含有的目的基因的种胚。

   （1）利用花粉粒通道法将毒素蛋白基因导入棉花细胞（获得抗虫棉），此过程是基因工程操作“四步曲”中的                                 。为减少获得目的基因的工作量和盲目性，在获得此目的基因时，应尽量采用                    的方法。

   （2）该目的基因在导入受体细胞前是否需要与运载体结合？并解释原因                    

                                                             。

   （3）检测目的基因是否表达的方法是                                                      

                                                                            。

   （4）假设以土壤农杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制性内切酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。连接产物至少有           种环状DNA分子，它们分别是                             。

   （5）将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T—DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因植物自交F₁代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的           ，原因是                                

                                                                          。