1.基因工程的基本工具 限制酶 dna连接酶 (运)载体作用 切割目的基因和载体 拼接dna片段形成重组dna 携带目的基因进入受体细胞作用部位 两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键 作用特点(条件) ①识别特定的核苷酸序列 ②在特定位点上切割 ①e•colidna连接酶只能连接黏性末端 ②t4dna连接酶能连接黏性末端和平(口)末端 ①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制 ②有一个或多个限制酶切割位点 ③具有特殊的标记基因 2.基因工程的操作步骤 (1)目的基因的获取: ①从基因文库中获取。②利用pcr技术扩增。③用化学方法直接人工合成。 (2)基因表达载体的构建: ①基因表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。 ②基因表达载体的构建方法: