2013
高考生物考前回扣---现代生物科技专题 一、网络构建 二、基础回扣 专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外dna重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在dna分子水平上进行设计和施工的，又叫做dna重组技术。 （一）基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链dna分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的dna片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——dna连接酶 (1)两种dna连接酶（e•colidna连接酶和t4-dna连接酶）的比较： ①相同点：都缝合磷酸二酯键。 ②区别：e•colidna连接酶来源于t4噬菌体，只能将双链dna片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而t4dna连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。 (2)与dna聚合酶作用的异同:¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬dna聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。dna连接酶是连接两个dna片段的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源dna片段插入。 ③具有标记基因，供重组dna的鉴定和选择。（2）最常用的载体是¬¬质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状dna分子。（3）其它载体： 噬菌体的衍生物、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取 1.目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 。 2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。
