第一部分 专题十一 (一)
一、选择题
1．图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是( )
a．图甲中的质粒用bamhⅰ切割后，含有4个游离的磷酸基团
b．在构建重组质粒时，可用pstⅰ和bamhⅰ切割质粒和外源dna
c．用pstⅰ和hindⅲ酶切，加入dna连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒
d．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
[答案] c
[解析] 图甲中的质粒用bamhⅰ切割后，会破坏两个磷酸二酯键，磷酸二酯键是由相邻脱氧核苷酸的磷酸基团和脱氧核糖脱水形成的，因此只含有2个游离的磷酸基团；由于bamhⅰ的切割位点在目的基因的内部，使用它切割外源dna会破坏目的基因；用pstⅰ和hindⅲ切割质粒后，虽然破坏了ampr基因，但是会保留下neo基因作为标记基因，以备筛选。用pstⅰ和hindⅲ切割外源dna后，可得到两个能与质粒连接的dna片段，但是只有带目的基因的dna片段与酶切后的质粒连接才符合要求；由于氨苄青霉素抗性基因遭到破坏，因此，只能用含新霉素的培养基进行筛选。
2. (多选)(2014•江苏，23)下列关于基因工程技术的叙述，错误的是( )
a．切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
b．pcr反应中温度的周期性改变是为了dna聚合酶催化不同的反应
c．载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
d．抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
[答案] abc
[解析] 本题考查基因工程的相关知识。不同的限制性核酸内切酶特异性地识别核苷酸序列不同，a错误；酶具有专一性，pcr反应中温度的周期性改变是为了不同的酶将dna解旋、扩增，b错误；载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，c错误；基因成功插入
